Иммунологический анализ: цели и описание

Иммунологические анализы используются для обнаружения или количественного определения конкретного вещества и его анализа через образец крови или жидкости. Иммунологические исследования обладают высокой чувствительностью и специфичностью, которая является результатом применения антител и очищенных антигенов в качестве реагентов. Антитело представляет собой белок (иммуноглобулин), которые продуцируются В-лимфоцитами (иммунными клетками) в ответ на стимуляцию антигеном. Иммунологические тесты могут измерить образования комплексов антиген-антитело и обнаружить их с помощью индикаторной реакции. Высокая чувствительность достигается за счет использования системы показателей, что приводит к амплификации измеряемого продукта.

Иммунологический анализ может быть качественным (положительный или отрицательный) или количественным (количество измеряется). Примером качественного анализа является иммунологический тест на беременность.

Цели иммунологического анализа

Целью иммунологических исследований является измерение (или, в качественном анализе, обнаружение) анализируемого вещества. Иммунологический метод – достаточно дорогостоящие тесты. Общие области их применения включают измерение лекарств, гормонов, специфических белков, опухолевых маркеров, а также маркеров сердечной травмы. Качественные иммунологические тесты часто используются для выявления антигенов, инфекционных агентов и антител, которые организм вырабатывает для борьбы с ними. Например, иммунологические анализы используются для выявления антигенов определенных организмов в цереброспинальной жидкости людей, больных менингитом. Иммунологические исследования также используются для обнаружения антигенов, связанных с организмами, которые трудно культивировать, таких, как вирус гепатита В и некоторых других. Иммунологические тесты на антитела при вирусных гепатитах, ВИЧ и болезни Лайма, обычно используются для выявления этих заболеваний.

Описание типов иммунологических исследований

Иммунопреципитация. Простейший метод иммуноанализа на количество осадка, который образуется после того, как антитело-реагент (преципитация) имеет взаимодействие с образцом, и подвергается взаимодействию с соответствующим ему антигеном с образованием нерастворимого агрегата. Иммунопреципитационные реакции могут быть качественным или количественным.

Иммунологические частицы. Частица в этом тесте способна связывать множество молекул антигена одновременно, что значительно ускоряет скорость видимой реакции. Это позволяет быстро обнаружить антитела, которые являются маркерами таких заболеваний, как инфекционный мононуклеоз и ревматоидный артрит.

Иммунонефелометрия. Непосредственное объединение антител и антигенов иммунных комплексов, которые слишком малы, чтобы осесть. Тем не менее, эти комплексы будут рассеивать падающий свет, и могут быть измерены с помощью прибора – нефелометра. Концентрация антигена может быть определена в течение нескольких минут реакции.

Радиоиммуноанализ. Представляет собой способ, использующий радиоактивные изотопы, чтобы маркировать либо антиген, либо антитела. Основные преимущества RIA, по сравнению с другими методами иммуноанализа, высокая чувствительность, а также хорошо зарекомендовавшие себя экспресс-анализы. Основными недостатками являются риски для здоровья и безопасности, связанные с использованием излучения. По этой причине радиоиммуноанализ был в значительной степени заменен в обычной клинической лабораторной практике на иммуноферментный анализ.

Иммуноферментный анализ. Разработан в качестве альтернативы радиоиммуноанализу. Этот метод использует фермент, маркирующий или антитела, или антигены. Чувствительность EIA приближается к RIA, и нет опасности, исходящей от радиоактивных изотопов.

Флуоресцентный иммуноанализ. Относится к ряду тестов, которые используют флуоресцентную или ферментную метку, которая действует на субстрат с образованием флуоресцентного продукта. Флуоресцентные измерения по своей природе более чувствительны, чем колориметрические (спектрофотометрические) измерения. Поэтому методы FIA имеют большую аналитическую чувствительность, чем методы EIA, которые используют оптическую плотность при измерении.

Меры предосторожности

Образцы крови собирают из локтевой вены с помощью иглы, при этом необходимости в ограничении жидкости или пищи до сбора нет.

Особые меры предосторожности должны соблюдаться при выполнении тестов RIA. Количество радиоизотопа должны быть документально подтверждено как для жидких так и твердых отходов. Утечка или разливы радиоактивных реагентов должны быть измерены на радиоактивность, количество радиации, локализация и утилизация отходов документально подтверждены.

Нормальные результаты

Иммунологические анализы, которые являются качественными, представлены как положительные или отрицательные. Количественные иммунологические тесты представлены в единицах массы, наряду с опорными интервалами (нормальными диапазонами). Нормальный диапазон может быть зависимым от возраста и пола пациента. Положительный анализ на ВИЧ и наркотики обычно требует подтверждающего тестирования.

Хотя иммунологические исследования обладают высокой чувствительностью и специфичностью, могут возникнуть ложные положительные и отрицательные результаты. Ложноотрицательные результаты могут быть вызваны неправильным хранением образца или лечением пациента, порчей реагентов или неисправностью техники. Ложно-положительные результаты иногда рассматриваются у пациентов, которые имеют определенные антитела. Ложно-положительные результаты также могут быть вызваны определенными веществами в крови или моче, которые вступают в перекрестную реакцию или связываються с антителом, используемом в тесте.

Иммунологические анализы: подготовка

Как правило, пациентам не требуется давать никаких специальных инструкций перед тестированием. Некоторые анализы требуют сбор образцов, в то время как другие могут иметь специальные диетические ограничения.

При заборе крови из вены требуется наложение повязки для достижения свертываемость крови.

Риски иммунологических исследований

Иммунологические тесты не связаны с осложнениями. Когда идет сбор крови, может иметь место небольшое кровотечение в кожу и последующие кровоподтеки. Пациент также может испытывать головокружение или тошноту от вида крови.

Автор статьи: Валерий Викторов, «Портал Московская медицина»©

Отказ от ответственности: Информация, представленная в этой статье про иммунологический анализ, предназначена только для информирования читателя. Она не может быть заменой для консультации профессиональным медицинским работником.